熒光微球通常是指形狀為球形，直徑在幾納米至幾十微米之間，微球表面或內(nèi)部負(fù)載有熒光物質(zhì)，在受到一定的能量激發(fā)時(shí)能夠發(fā)出熒光的微粒。與純熒光化合物相比，熒光微球具有相對穩(wěn)定的發(fā)光行為和形態(tài)結(jié)構(gòu)。綠色熒光微球是用于體外診斷、血流測定、成像，以及流式細(xì)胞儀校準(zhǔn)的微球。綠色熒光微球填充了高性能的油溶性熒光染料，靈敏度高，穩(wěn)定性高。

　　下面讓我們來了解一下熒光微球的三種檢測應(yīng)用吧

　　1、熒光微球用于核酸檢測

　　利用不同顏色的上轉(zhuǎn)發(fā)光材料編碼的微球可用于結(jié)合不同的報(bào)告標(biāo)簽，當(dāng)結(jié)合上單鏈的DNA之后，熒光強(qiáng)度會顯示不同。利用類似的方法，將上轉(zhuǎn)發(fā)光的納米顆粒包裹在聚苯乙烯的微球內(nèi)部，調(diào)整上轉(zhuǎn)納米顆粒(不同發(fā)射波長)的比例，可以獲得不同的熒光編碼微球。

　　上轉(zhuǎn)發(fā)光編碼微球與報(bào)告分子的染料標(biāo)記沒有光學(xué)交叉，因此標(biāo)記染料到熒光波長可選擇范圍很寬。量子點(diǎn)編碼的微球也可用于結(jié)合目標(biāo)DNA分子，利用微流控芯片的層流以及外部的磁力，報(bào)告分子、清洗劑通過磁力的作用產(chǎn)生了三股流體，利用量子點(diǎn)標(biāo)記的微球，進(jìn)行雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)之后的信號出現(xiàn)增強(qiáng)的現(xiàn)象，因此量子點(diǎn)編碼的微球可以用于在人的肺癌細(xì)胞中進(jìn)行miRNA的過表達(dá)的多重檢測(圖2所示)。

　　2、熒光微球用于蛋白質(zhì)檢測

　　多重顏色的量子點(diǎn)結(jié)合的微球廣泛被證實(shí)能夠用于多重抗原的同時(shí)檢測，包括IgG，腫瘤標(biāo)志物，病原標(biāo)志物等，使用上轉(zhuǎn)換納米顆粒以及攜帶磁性納米納米顆粒標(biāo)記的微球可以同時(shí)檢測兩種不同的抗原。

　　基于微流控技術(shù)，利用AFP ( FEMMs 熒光編碼的磁珠) 對Fe3O4納米顆粒的磁性富集以及分離(高溫化學(xué)溶脹的方式)，量子點(diǎn)以及Fe3O4納米顆粒與微球的通過高分子鏈端或者疏水作用進(jìn)行有效的結(jié)合，該技術(shù)也廣泛的應(yīng)用于一些多重生物標(biāo)志物的檢測。

　　3、熒光微球用于細(xì)菌檢測

　　傳統(tǒng)的細(xì)菌檢測(例如微量肉湯稀釋法或者E-測試)所需時(shí)間周期長，因此需要開發(fā)能夠快速以及高效地對多重細(xì)菌進(jìn)行檢測。

　　Ozcan組利用了聚苯乙烯微球能夠快速對寄生于人角膜以及結(jié)膜的金黃色葡萄球菌進(jìn)行快速的計(jì)數(shù)。Wang課題組將熒光微球與萬古激素(vancomycin)進(jìn)行孵育，通過氫鍵與細(xì)菌細(xì)胞壁上的連接酶進(jìn)行結(jié)合，通過熒光磁珠微球的擴(kuò)散方式來有效識別溶液中活細(xì)菌或者死細(xì)菌。